Ihe osisi na ihe ndị na-akpata ọrịa
Dr. Pat Brown na Mahadum Illinois (nke dị ugbu a na UC Davis) nyere ọnụọgụgụ ndị na-egosi maapụ sorghum nke a maara dị ka sorghum converting population (SCP). Akọwaala ya na mbụ ma bụrụkwa nchịkọta nke ahịrị dị iche iche agbanwere gaa na photoperiod-enweghị mmetụta na obere ogologo iji mee ka uto na mmepe nke osisi dị na gburugburu US dị mfe. Ejiri ahịrị 510 sitere na ndị a mee ihe na ọmụmụ ihe a, ọ bụ ezie na n'ihi nsogbu na-adịghị mma na njikwa mma ndị ọzọ, ọ bụghị ahịrị niile ka ejiri mee ihe na nyocha nke àgwà atọ ahụ. N'ikpeazụ, ejiri data sitere na ahịrị 345 mee ihe maka nyocha nke nzaghachi chitin, ahịrị 472 maka nzaghachi flg22, na 456 maka iguzogide TLS.B. kukiE nwetara ụdị LSLP18 site n'aka Dr. Burt Bluhm na Mahadum Arkansas.
Nha nzaghachi MAMP
E jiri MAMP abụọ dị iche iche mee ihe n'ọmụmụ ihe a flg22, (Genscript catalog # RP19986), na chitin. A kụrụ osisi ọka n'ime ihe e tinyere n'elu ala jupụtara na ala (33% Sunshine Redi-Earth Pro Growing Mix) n'ime ụlọ ntu. A na-agba osisi mmiri n'ụbọchị tupu a chịkọta ihe nlele iji zere mmiri mmiri karịa n'ụbọchị a chịkọtara ha.
E tinyere ahịrị ndị ahụ n'usoro, e wee kụọ ha n'ìgwè ahịrị iri isii. Maka ahịrị nke ọ bụla, a kụrụ 'ite' atọ na mkpụrụ abụọ n'ahịrị ọ bụla. A kụrụ ha n'ìgwè ndị sochirinụ ozugbo e mechara nhazi ha n'ọkwa gara aga ruo mgbe a tụlere ọnụọgụgụ mmadụ niile. E mere nnwale abụọ maka MAMP abụọ ahụ, e mekwara genotypes ọzọ n'ọkwa nke ọ bụla n'ime ha.
E mere nnwale ROS dịka akọwara na mbụ. N'ụzọ dị mkpirikpi, maka ahịrị nke ọ bụla, a kụrụ mkpụrụ isii n'ime ite atọ dị iche iche. Site na mkpụrụ ndị a kụrụ, a họọrọ atọ dabere na otu ha si dị. Ejighị mkpụrụ ndị yiri ihe pụrụ iche ma ọ bụ ndị dị ogologo ma ọ bụ dị mkpụmkpụ karịa ọtụtụ. E wepụrụ diski akwụkwọ anọ nke dayameta 3 mm n'akụkụ kachasị sara mbara nke akwụkwọ nke anọ nke osisi sorghum atọ dị ụbọchị iri na ise. Otu diski kwa akwụkwọ site na osisi abụọ na diski abụọ site na otu osisi, diski nke abụọ wee bụrụ njikwa mmiri (lee n'okpuru). E tinyere diski ndị ahụ n'elu 50 µl H20 n'ime efere ojii nke nwere olulu 96, mechie ya na mkpuchi aluminom iji zere ikpughe ya na ìhè, ma debe ya n'ọnọdụ okpomọkụ ụlọ n'abalị. N'ụtụtụ echi ya, e jiri 2 mg/ml chemiluminescent probe L-012 (Wako, katalọgụ # 120-04891), 2 mg/ml horseradish peroxidase (Ụdị VI-A, Sigma-Aldrich, katalọgụ # P6782), na 100 mg/ml Chitin ma ọ bụ 2 μM nke Flg22 mee ihe ngwọta mmeghachi omume. E tinyere 50 µl nke ngwọta mmeghachi omume a na atọ n'ime olulu anọ ahụ. Olulu nke anọ bụ njikwa mock, nke e tinyere ihe ngwọta mmeghachi omume na-agụnyeghị MAMP. E tinyekwara olulu anọ efu nwere naanị mmiri na efere ọ bụla.
Mgbe etinyere ngwọta mmeghachi omume ahụ, a tụrụ ọkụ site na iji SynergyTM 2 multi-detection microplate reader (BioTek) kwa nkeji abụọ maka otu awa. Onye na-agụ efere ahụ na-ewere nha ọkụ kwa nkeji abụọ n'ime awa 1 a. A gbakọrọ ngụkọta nke ọgụgụ 31 niile iji nye uru maka olulu ọ bụla. A gbakọrọ uru atụmatụ maka nzaghachi MAMP maka genotype ọ bụla dị ka (uru ọkụ nkezi nke olulu nnwale atọ ahụ—uru olulu mock) - ewezuga nkezi uru olulu efu. Uru olulu efu ahụ dị nso na efu mgbe niile.
Diski akwụkwọ nkeNicotiana bentamiana, otu ahịrị ọka wig dị elu (SC0003), na otu ahịrị ọka wig dị ala (PI 6069) ka etinyere dị ka njikwa na efere olulu 96 ọ bụla maka ebumnuche njikwa mma.
B. kukiNkwadebe na ịgba ọgwụ mgbochi ọrịa
B. kukiA kwadebere inoculum dịka akọwara na mbụ. N'ụzọ dị mkpirikpi, a na-etinye ọka sorghum n'ime mmiri ruo ụbọchị atọ, sachaa ya, tụba ya n'ime otu lita iko conical ma tinye ya n'onwe ya ruo otu awa na okpomọkụ 15psi na 121 Celsius. E mesịa, a na-etinye ihe dị ka 5 ml nke mycelia a mịrị amị sitere na ọdịbendị ọhụrụ n'ime mkpụrụ ọka ndị ahụ.B. kukiA na-ewepụ LSLP18 ma hapụ ya ruo izu abụọ n'ọnọdụ okpomọkụ ụlọ, na-ama jijiji karama ndị ahụ kwa ụbọchị atọ. Mgbe izu abụọ gachara, a na-akpọnwụ mkpụrụ ọka sorghum ndị ero ahụ metụtara n'ikuku wee chekwaa ha na okpomọkụ 4°C ruo mgbe a ga-agba ha ọgwụ n'ubi. E jiri otu inoculum ahụ mee nnwale ahụ dum ma mee ka ọ dị ọhụrụ kwa afọ. Maka ịgba ọgwụ ahụ, a na-etinye mkpụrụ ọka isii ruo iri ndị nwere ọrịa n'ime mkpụrụ osisi sorghum ndị dị izu anọ ruo ise. Mkpụrụ osisi ndị sitere na ero ndị a butere ọrịa n'ime osisi sorghum ndị na-eto eto n'ime otu izu.
Nkwadebe mkpụrụ
Tupu a kụọ mkpụrụ ọka sorghum n'ubi, a na-eji ọgwụ fungicides, ọgwụ ahụhụ, na ngwakọta nchekwa nke nwere ~ 1% Spirato 480 FS fungicides, 4% Sebring 480 FS fungicides, 3% Sorpro 940 ES seed safener. E mesịa, a kpọrọ mkpụrụ ndị ahụ nkụ n'ikuku ruo ụbọchị atọ, nke mere ka ha kpuchie ngwakọta a gburugburu mkpụrụ ndị ahụ. Nke kachasị mma kwere ka e jiri ọgwụ ogwu Dual Magnum mee ihe dị ka ọgwụgwọ tupu ha apụta.
Nyocha nke iguzogide ntụpọ akwụkwọ Target
A kụrụ SCP na Central Crops Research Station dị na Clayton, NC na June 14–15 2017 na June 20, 2018 n'ime nhazi blọk zuru oke nke enweghị usoro, yana nnwale abụọ n'ọnọdụ nke ọ bụla. A kụrụ nnwale n'ahịrị otu mita 1.8, yana obosara ahịrị 0.9 m site na iji mkpụrụ iri n'otu ala. A kụrụ ahịrị ókè abụọ gburugburu mpụta nke nnwale ọ bụla iji gbochie mmetụta dị n'akụkụ. A gbara ọgwụ mgbochi na Julaị 20, 2017 na Julaị 20, 2018, ebe osisi sorghum nọ n'ọkwa uto nke atọ. E tinyere nyocha na nha otu ruo itoolu, ebe a natara akara osisi na-egosighi ihe ịrịba ama nke ọrịa ka e nyere akara osisi itoolu na ndị nwụrụ anwụ kpamkpam dị ka otu. E mere nyocha abụọ na 2017 na ọgụgụ anọ na 2018 malite izu abụọ mgbe a gbasịrị ọgwụ kwa afọ. A gbakọrọ sAUDPC (ebe a na-ahazi n'okpuru usoro ọganihu ọrịa) dịka akọwara na mbụ.
Oge ozi: Eprel-01-2021