Osisi na ihe ndị na-akpata ọrịa
Dr. Pat Brown nyere ọnụ ọgụgụ ndị na-ese maapụ sorghum nke a maara dị ka ọnụ ọgụgụ ndị ntụgharị sorghum (SCP) na Mahadum Illinois (ugbu a na UC Davis).A kọwapụtara ya na mbụ na ọ bụ nchịkọta ahịrị dị iche iche gbanwere ka ọ bụrụ enweghị mmetụta nke oge foto na obere ogologo iji kwado uto na mmepe nke osisi na gburugburu US.Ejiri ahịrị 510 sitere na ọnụ ọgụgụ ndị a n'ọmụmụ ihe a ọ bụ ezie na n'ihi germination na-adịghị mma na njikwa mma ndị ọzọ, ọ bụghị ahịrị niile ka ejiri nyocha nke njirimara atọ ahụ.N'ikpeazụ, ejiri data sitere na ahịrị 345 maka nyocha nke nzaghachi chitin, ahịrị 472 maka nzaghachi flg22, yana 456 maka nguzogide TLS.B. kukistrain LSLP18 nwetara site na Dr. Burt Bluhm na Mahadum Arkansas.
Nleta nzaghachi MAMP
Eji MAMP abụọ dị iche iche mee ihe n'ọmụmụ ihe a flg22, (Katalọgụ Genscript # RP19986), na chitin .A na-akụ osisi sorghum na ntinye nke tọgbọrọ n'elu ala jupụtara na ala (33% Sunshine Redi-Earth Pro Growing Mix) na griin haus.A na-agba osisi mmiri n'ụbọchị tupu nchịkọta ihe nlele iji zere mmiri mmiri n'ụbọchị nchịkọta.
A na-ekewa ahịrị ndị ahụ na, n'ihi ihe mgbakasị ahụ, a kụrụ ya na batches nke ahịrị 60.Maka ahịrị nke ọ bụla, a kụrụ 'ite' atọ nwere mkpụrụ abụọ n'otu ahịrị.A kụrụ ogbe ndị sochiri ya ozugbo edozichara ogbe gara aga ruo mgbe enyochala mmadụ niile.Emere ọsọ nnwale abụọ maka MAMPs abụọ nwere genotypes na-agbanwegharị na nke ọ bụla n'ime ọsọ abụọ a.
Emere nyocha ROS dị ka akọwara na mbụ.Na nkenke, maka ahịrị ọ bụla, a kụrụ mkpụrụ isii n'ime ite atọ dị iche iche.Site na mkpụrụ osisi ndị a rụpụtara, a họpụtara atọ dabere na otu.A naghị eji mkpụrụ osisi ndị yiri ihe ọhụrụ ma ọ bụ ndị toro ogologo ma ọ bụ dị mkpụmkpụ karịa ọtụtụ.E wepụrụ diski mpempe akwụkwọ anọ nke dayameta 3 mm n'akụkụ kachasị nke akwụkwọ 4 nke osisi sorghum atọ dị iche iche dị ụbọchị iri na ise.Otu diski kwa akwukwo sitere na osisi abụọ na diski abụọ sitere na otu osisi, diski nke abụọ na-aghọ njikwa mmiri (lee n'okpuru).A na-efegharị diski ndị ahụ n'otu n'otu na 50 µl H20 na efere ojii 96, ejiri akara aluminom mechie iji zere ikpughe na ìhè, ma debe ya na ụlọ okpomọkụ n'otu abalị.N'ụtụtụ echi, e mere ngwọta mmeghachi omume site na iji 2 mg/ml chemiluminescent probe L-012 (Wako, katalọgụ # 120-04891), 2 mg/ml horseradish peroxidase (Ụdị VI-A, Sigma-Aldrich, katalọgụ # P6782), na 100 mg/ml Chitin ma ọ bụ 2 μM nke Flg22.Agbakwunyere 50 µl nke ngwọta mmeghachi omume a na atọ n'ime olulu mmiri anọ ahụ.Ọmarịcha nke anọ bụ njikwa ịkwa emo, nke agbakwunyere azịza mmeghachi omume na-ewepu MAMP.A na-etinyekwa olulu mmiri anọ nwere naanị mmiri na efere nke ọ bụla.
Mgbe ịgbakwunye azịza mmeghachi omume, a tụrụ luminescence site na iji SynergyTM 2 multi-detection microplate reader (BioTek) ọ bụla 2 min maka 1 hr.Onye na-agụ efere efere na-atụ nha luminescence kwa nkeji 2 n'ime awa 1 a.A gbakọrọ nchikota nke ọgụgụ 31 niile iji nye uru maka olulu mmiri nke ọ bụla.A gbakọrọ ọnụ ahịa echere maka nzaghachi MAMP maka genotype ọ bụla dị ka (nkezi uru luminescence nke olulu mmiri nnwale atọ - uru nke ọma na-akwa emo) - na-ewepu nkezi uru nke ọma.Ụkpụrụ olulu mmiri oghere na-anọkarị nso na efu.
Akwụkwọ diski nkeNicotiana benthamiana, Otu eriri sorghum dị elu (SC0003), na otu ahịrị sorghum dị ala (PI 6069) gụnyekwara dị ka njikwa na efere 96 ọ bụla maka njikwa mma.
B. kukinkwadebe inoculum na inoculation
B. kukia kwadebere inoculum dị ka akọwara na mbụ.Na nkenke, a na-etinye mkpụrụ ọka sorghum n'ime mmiri ruo ụbọchị atọ, sachaa ya, gbanye ya na 1L conical flasks na autoclaved maka otu awa na 15psi na 121 Celsius.A na-eji ihe dị ka 5 ml nke macerated mycelia gbanye ọka ndị ahụ site na omenala ọhụrụB. kukiLSLP18 kewapụrụ wee hapụ izu 2 n'ime ụlọ okpomọkụ, na-amanye flask kwa ụbọchị 3 ọ bụla.Mgbe izu 2 gachara, a na-ekpocha mkpụrụ osisi sorghum nke ero ahụ n'ikuku wee debe ya na 4 Celsius C ruo mgbe a ga-etinye ya n'ọhịa.A na-eji otu inoculum mee ihe maka ule niile ma mee ka ọ dị ọhụrụ kwa afọ.Maka inoculation, a na-etinye mkpụrụ osisi 6-10 n'ime mkpụrụ osisi sorghum dị izu 4-5.Akpụkpọ anụ ndị a na-esi na fungi ndị a butere ọrịa n'osisi sorghum na-eto eto n'ime otu izu.
Nkwadebe mkpụrụ
Tupu ịkụ mkpụrụ sorghum n'ọhịa, a na-eji ọgwụ fungicides, ụmụ ahụhụ, na ngwakọta nchebe nwere ~ 1% Spirato 480 FS fungicide, 4% Sebring 480 FS fungicide, 3% Sorpro 940 ES mkpụrụ osisi.Mgbe ahụ, a na-amịkọrọ mkpụrụ ndị ahụ maka ụbọchị 3 nke na-enye ihe mkpuchi dị mkpa nke ngwakọta a gburugburu osisi.Onye nchekwa ahụ kwere ka ojiji nke ahịhịa ahịhịa Dual Magnum dị ka ọgwụgwọ mmalite mmalite.
Nlele nke nguzogide ntule akwukwo ahihia
A kụrụ SCP na Central Crops Research Station na Clayton, NC na June 14-15 2017 na June 20, 2018 n'ụdị ngọngọ zuru oke nke nwere ntụgharị nnwale abụọ na nke ọ bụla.A na-akụ nnwale n'otu ahịrị 1.8 m nwere obosara ahịrị 0.9 m site na iji mkpụrụ 10 n'otu ebe.A kụrụ ahịrị oke ala abụọ n'akụkụ mpụta nnwale ọ bụla iji gbochie mmetụta ihu.Emere nnwale ndị ahụ na July 20, 2017 na July 20, 2018 bụ ebe osisi sorghum nọ na-eto eto 3. A na-ewere ọkwa n'otu akpịrịkpa na itoolu, ebe osisi na-egosi na ọ nweghị ihe ịrịba ama nke ọrịa ka agbatara dị ka itoolu na kpamkpam. a tụrụ osisi nwụrụ anwụ dịka otu .Ewere ọkwa abụọ na 2017 na agụ anọ na 2018 na-amalite izu abụọ ka emechara ọgwụ kwa afọ.sAUDPC (mpaghara ọkọlọtọ n'okpuru usoro ọganihu ọrịa) gbakọrọ dịka akọwara na mbụ.
Oge nzipu: Eprel-01-2021